MÉTODOS DE ESTUDOS DAS CÉLULAS
O presente texto retrata sobre a biologia celular, tendo como ponto principal algumas técnicas utilizadas para o estudo das células. De início é explicada a citologia, o ramo que estuda a célula, logo depois é colocado alguns métodos que podem ser usados, como a microscopia, a cultura celular, imunocitoquímica, hibridização in situ, reação em cadeia da polimerase, fragmentação celular e citometria de fluxo. Durante o estudo deste texto podemos conhecer sobre a função e o que cada método é capaz de fazer.
BIOLOGIA CELULAR
A Biologia celular ou Citologia é o ramo da biologia que estuda as células no que diz respeito à sua estrutura, suas funções e sua importância na complexidade dos seres vivos. Concentra-se no entendimento do funcionamento dos vários sistemas celulares, no aprendizado de como estas células são reguladas e na compreensão do funcionamento de suas estruturas, sendo portanto, a biologia celular o estudo detalhado da célula. O campo de estudo da biologia celular engloba tanto a grande diversidade de organismos unicelulares, como bactérias e protozoários, bem como as muitas células especializadas dos organismos multicelulares, como os seres humanos e plantas.
Algumas técnicas usadas para estudar as células
- Microscopia: todas as células podem ser estudadas pelo microscópio óptico, microscópio eletrônico de transmissão, microscópio eletrônico de varredura, microscópio de fluorescência e por microscopia confocal. O microscópio óptico é um instrumento usado para ampliar estruturas pequenas, funcionando com um conjunto de lentes (ocular e objetiva) que ampliam a imagem transpassada por um feixe de luz. O poder máximo de aumento do microscópio óptico é de 1000 vezes. O microscópio eletrônico tem um potencial de aumento muito superior ao óptico. A diferença básica entre o microscópio óptico e o eletrônico é que neste último não é utilizada a luz, mas sim feixes de elétrons. No microscópio eletrônico não há lentes de cristal e sim bobinas, chamadas de lentes eletromagnéticas, conseguindo aumentos de 500 mil a 1 milhão de vezes. Existem três tipos de microscópio eletrônico básico: de transmissão, usado para a observação de cortes ultra finos; de varredura (ou M.E.V.), capaz de produzir imagens de alta ampliação para a observação de superfícies; de tunelamento (ou M.E.V.T.), para visualização de átomos.
- Cultura celular: É o processo no pelo qual as células são colocadas para crescer e desenvolver sob condições controladas, fora de seu ambiente natural. Essa técnica possibilita o estudo do comportamento das células vivas por um tempo mais longo.
- Imunocitoquímica: é o conjunto de técnicas que utilizam anticorpos para identificar proteínas específicas dentro das células. Produz-se, em laboratório, um anticorpo capaz de ligar-se a uma proteína específica dentro da célula. Este anticorpo é marcado com uma substância fluorescente, como por exemplo a fluoresceína. Após entrar em contato com a célula, o anticorpo liga-se a proteína a ser estudada e, devido a presença da substância fluorescente, pode ser facilmente identificado com o uso de microscópio de fluorescência, ajudando a localizar onde a proteína é armazenada dentro da célula.
- Hibridização in situ : Técnica usada para localizar segmentos de DNA (genes) ou RNA em uma amostra de células. É utilizada, em outras coisas, para avaliar a estrutura dos cromossomos, além de auxiliar no diagnóstico médico de mutações genéticas.
- Reação em cadeia da polimerase: É um método de criação de múltiplas cópias de DNA, usada em situações onde a quantidade de DNA disponível é reduzida. Ajuda na identificação de mutações e preparação de fragmentos de DNA para clonagem.
- Fragmentação celular: Permite o estudo das organelas que constituem a célula. Inicialmente é feita as célula são colocadas em solução com sacarose e posteriormente feita e ruptura mecânica da membrana celular. Depois disso, a solução é colocada em uma centrífuga, onde sofre um processo de centrifugação fracionada, ou seja, a cada período de centrifugação, o sobrenadante é separado e centrifugado novamente com mais força. Com isso, é possível separar as organelas de acordo com seu peso, por exemplo, inicialmente é separado os núcleos, de pois de uma nova centrifugação mais potente é possível separar as mitocôndrias, posteriormente o retículo endoplasmático e finalmente os ribossomos.
- Citometria de fluxo: é uma técnica utilizada para contar, examinar e classificar células suspensas em meio líquido em fluxo. Consegue separar as células de acordo com a fase do ciclo celular, possibilitando o estudo como determinadas substâncias afetam a o processo de divisão celular.
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